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作者:admin?????時間:2015-08-31 08:07:47
產品簡介:
產品編號 | 產品名稱 | 產品包裝 |
D2737 | pCMV-N-His | 1μg |
pCMV-N-His是晶安生物自行研發的用于在哺乳動物細胞中表達N端和His tag(His標簽)融合的目的蛋白
的表達質粒。含有CMV啟動子可以高效啟動目的蛋白在細胞中的表達;在多克隆位點的5'端含有一個可以編碼His標簽的序列,因此可以表達出含有His標簽的融合蛋白,可以方便地使用抗 His的抗體來識別目的蛋白,有利于目的蛋白檢測和分離純化。質粒為卡那霉素抗性。轉染細胞后,可使用G418篩選穩定表達目的蛋白的細胞株。
pCMV-N-His質粒的主要信息如下:
Feature Nucleotide &nb sp; Position
CMV promoter &nb sp; 1–602
T3 promoter and T3 primer binding site 620–639
His tag &nb sp; 679–696
multiple cloning site &nb sp; 699–772
T7 promoter and T7 primer binding site 815–836
SV40 polyA signal &nb sp; 847–1230
f1 origin of ss-DNA replication 1368–1674
bla promoter &nb sp; 1699–1823
SV40 promoter &nb sp; 1843–2181
neomycin/kanamycin resistance ORF 2216–3007
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal 3008–3466
pUC origin &nb sp; 3595–4262
pCMV-N-His質粒的圖譜如下:
pCMV-N-His的多克隆位點的詳細圖譜如下:
&nb sp; His tag XmaI
SacI M H H H H H H SmaI
651 GAGCTCCACC GCGGTGGCGG CCGCCATGCA TCATCACCAT CACCATAGCC
CTCGAGGTGG CGCCACCGCC GGCGGTACGT AGTAGTGGTA GTGGTATCGG
PstI
BamHI HindIII EcoRI EcoRV SalI BglII XhoI
701 CGGGCGGATC CAAGCTTCTG CAGGAATTCG ATATCGTCGA CAGATCTCTC
GCCCGCCTAG GTTCGAAGAC GTCCTTAAGC TATAGCAGCT GTCTAGAGAG
XbaI ApaI KpnI KpnI
751 GAGTCTAGAA CTAGTGGGCC CGGTACCTTA ATTAATTAAG GTACCAGGTA
CTCAGATCTT GATCACCCGG GCCATGGAAT TAATTAATTC CATGGTCCAT
pCMV-N-His中沒有的酶切位點(Restriction enzymes that do not cut pCMV-N-His)包括:
Afl II Age I Ahd I Asc I Bbs I Bbv II Blp I
Bsg I BsiW I BsmB I BspM II BsrG I BssH II Bst1107 I
BstE II Ear I Eco47 III Eco72 I EcoN I Esp I Fse I
Nru I PflM I Pme I Pml I PpuM I Psp1406 I Sap I
Sca I Spl I
pCMV-N-His中的單酶切位點(Restriction enzymes that cut pCMV-N-His once)包括:
Nde I CA`TA,TG 241 |
Pvu I CG,AT`CG 849 |
pCMV-N-His質粒中對于插入片斷進行測序時,推薦使用的正向測序引物T3和反向測序引物T7的序列
如下:
T3 primer(620–639): 5′AATTAACCCTCACTAAAGGG 3′
T7 primer(815-836): 5′GTAATACGACTCACTATAGGGC 3′
pCMV-N-His的全序列信息: D2737 pCMV-N-His-seq.txt
包裝清單:
產品編號 |
產品名稱 |
包裝 |
D2737 |
pCMV-N-His |
1μg |
— |
說明書 |
1份 |
保存條件:
-20℃保存。
注意事項:
本質粒未經晶安生物書面許可不得用于任何